علوم آزمایشگاهی پیرا پزشکی اراک

قابل توجه :

در خواست خون بیمار ، ارسالی از بخش باید دارای مشخصات زیر باشد :

1.     نام ونام خانوادگی بیمار

2.    نام بخش وشماره تخت

3.   تاریخ در خواست قید شده باشد

4.   نام پزشک معالج

5.    سن بیمار

6.    تشخیص بیماری

7.   مقدار واحد در خواست شده

آزمایش کراس مچ به دو منظور انجام می شود .

1.     بمنظور کشف اشتباهاتی که در تعیین گروه خون سیستم ABO , RH  صورت گرفته است .

2.    برای نشان دادن آنتی کورهایی بکار می رود که بطور طبیعی ویا در اثر ایمنی در سرم بیماران بوجود آمده وفعالانه بر علیهه گلبول های اهداء کننده خون عمل می کنند وقابل پیش بینی نیستند .

MAJOR SIDE  : سرم یا پلاسمای بیمار    +      گلبولهای قرمز اهداء کننده 

MINOR SIDE  : گلبولهای قرمز بیمار    +      سرم یا پلاسمای اهداء کننده

                                                                                 سازگار یا تجانس

ناسازگار یا عدم تجانس 

تعیین گرو خون وRh  

همیشه گروه خون را خود چک کنید وثبت نمایید وبه گفته بیمار ونقل قول دیگران اعتماد نکنید . گرو خون وRh  را داخل لوله انجام دهید                 ( با روش سل تایپ وبک تایپ ) .

مزیت روش لوله ای : در آنمی های شدید ودر بیمارانی که مرتباً خون دریافت میکنند ویا بیماران دیالیزی ، بعلت تیتر پائین آگلوتینین ها ، با این روش جواب دقیق حاصل خواهد شد .

 بعد از تعیین گروه خون بیمار ، کیسه ویا کیسه های خون هم گروه          ( ISOGROUP ) آنرا انتخاب نمائید . در صورت در خواست خون غیر  هم گروه مثلاً برای تعویض خون حتماً مراتب را با پزشک معالج در میان گذاشته ومسئولیت اورا در این مورد کتباً بخواهید .

روش تعیین گروه خون وRh  به روش لوله ای

  اگر سرم یا پلاسمای بیمار با O Cell واکنش داد از نظر O بمبئی و آلوآنتی بادی بررسی شود

به آرامی محتویات لوله را مخلوط کنید ، لوله ها را بمدت 15 الی 30 ثانیه با دور          g    1000

 یا (  3400rpm )  سروفیوژ شود ، چنانچه سروفیوژ نبود ، لوله ها را یک ساعت در دمای اتاق قرار دهید . لوله ها را به آرامی در مقابل روشنایی تکان دهید تا میزان آگلوتیناسیون سلول ها قابل بررسی باشند . آگلوتیناسیون با هر گونه شدت یا همولیز نشان دهندۀ واکنش مثبت می باشد . در غیر این صورت واکنش منفی می باشد وجهت تایید آن زیر میکروسکوب بررسی گردد . نتایج سل تایب وبک تایپ حتماً باهم باید منطبق باشد ، در غیر اینصورت از مرکز انتقال خون راهنمایی لازم را کسب نمائید .

 روی نمونه های Rh منفی نیز آزمایش Du گذاشته شود .

روش بررسی Rh منفی از نظر DU در

 یک لوله آزمایش

1.     سوسپانسیون 2 تا 5 درصد از RBC بیمار : 3 قطره

2.    آنتی سرم D                                        : 3 قطره

3.   15 الی 30 دقیقه انکوباسیون در بن ماری 37 درجه سانتیگراد .

4.   یک قطره آلبومین گاوی 22% از کناره دهانۀ داخلی لوله  اضافه شود .

5.    15 الی 30 دقیقه انکوباسیون در بن ماری 37 درجه سانتیگراد .

6.    یک دقیقه سانتریفوژ با دور 1500 rpm

7.   وجود آگلوتیناسیون دلیل مثبت بودن Rh است . در غیر اینصورت مراحل بعد را دنبال کنید

8.   سه مرتبه شستشو با سرم فیزیولوژی

9.     یک یا دو قطره آنتی هیومن به رسوب گلبولی حاصل اضافه نموده خوب مخلوط کنید

10. 45 ثانیه سروفیوژ شود .

11. عدم آگلوتیناسیون دلیل منفی بودن  Rh ووجود آگلوتیناسیون دلیل مثبت بودن DU می باشد .

        بیماران DU مثبت باید خونی که دریافت می نمایند حتماً Rh منفی باشد .

        خون افراد DUمثبت برای بیماران  Rh منفی مناسب نیست .

روش آزمایش کراس مچ با شیوه W.H.O

روش کراس مچ طبق دستور سازمان بهداشت جهانی بصورت زیر می باشد که دارای ویژگیهائی است واز نظر دقت های آماری درتجسس اتوآنتی بادی یا آنتی بادی غیر طبیعی سرد ویا گرم ، کامل ویا ناقص وهمچنین تمام فاکتورهای محیطی ، فیزیولوژیک وغیر لازم برای مشاهده آگلوتیناسیون در نظر گرفته شده است .

برای آزمایش کراس مچ لوله ها را به ترتیب جدول ذیل علامت گذاری نمائید ودر جا لوله ای نیز بهمین ترتیب عمل نمائید .

C = coold                                           4^oC

RT = Room Temperature                18 – 25^oC

S = saline                                            37^oC

AL = Bovine Albumine 22%            37^oC

IDC = Indirect Coombs Test            37^oC

1.      لواله هائی که دارای علامت C هستند ، یک ساعت در دمای یخچال4 دجه سانتیگراد قرار دهید ، سپس روی لام پخش کرده ونتایج را با میکروسکپ نوری قرائت نمائید .

2.     لواله هائی که دارای علامت RT هستند ، یک ساعت در دمای آزمایشگاه قرار دهید ، سپس روی لام پخش کرده ونتایج را با میکروسکپ نوری قرائت نمائید .

3.     لواله هائی که دارای علامت S هستند، یک ساعت در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار دهید ، سپس روی لام پخش کرده ونتایج را با میکروسکپ نوری قرائت نمائید .

4.     لواله هائی که دارای علامت AL هستند،نیم ساعت در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار دهید ، سپس یک قطره آلبومین گاوی 22% از کنار لوله اضافه کرده بدون مخلوط کردن نیم ساعت دیگر در بن ماری 37 درجه قرار دهید ، بعد روی لام پخش کرده ونتایج را با میکروسکپ نوری قرائت نمائید .

5.     لواله هائی که دارای علامت IDC هستند، یک ساعت در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار دهید ، سپس سه مرتبه با سرم فیزیولوژی شستشو داده وبه رسوب نهائی گلبولهای قرمز یک قطره آنتی هیومن اضافه نموده ، سروفیوژ نمائید وظرف 15 ثانیه نتایج را قرائت نمائید .

در مواقع اورژانس طی تماس با پزشک وخواستن مسئولیت از او ، زمان انکوباسیون را کم نمائید . 

نکات مهم در تفسیر مراحل وشرا یط انکوباسیون در کراس مچ WHO

1.      اتوکنترل : جهت تجسس آنتی بادیهای اتوایمون در بیمار ( گیرنده ) می باشد .

2.     P . Cell : جهت تجسس آنتی بادیهای نا منظم و یا غیر ذاتی  در بیمار ( گیرنده ) می باشد .

3.   Doonor   : اهدا ء کننده خون وفرآورده های خونی به بیمار می باشد .

4.   RT : جهت تجسس آنتی بادیهای سرد و کامل می باشد که در دمای کمتر از 25 درجه سانتیگراد بهتر واکنش می دهند مانند آنتی بادی های ضد   Le  , MN , P ₁        و از کلاس  IgM  می باشند  .

5.    S : جهت تجسس آنتی بادیهای گرم می باشد که در محیط سالین نرمال و دمای 37 درجه سانتیگراد واکنش می دهند مانند  آنتی بادی های ضد      Rh , Kell , Ss , JK و از کلاس  IgG  می باشند  .

6.    Alb : جهت تجسس آنتی بادیهای گرم می باشد که در محیط آلبومین و دمای 37 درجه سانتیگراد واکنش می دهند و از کلاس  IgG  می باشند  . آلبومین واکنش را با کاهش قدرت یونی محیط تقویت می کند .

7.   IDC : جهت تجسس آنتی بادیهای گرم می باشد که در محیط سالین نرمال و آلبومین  ودر دمای 37 درجه سانتیگراد واکنش نمی دهند مانند  آنتی بادی های ضد      K , JK^a و از کلاس  IgG  می باشند  ونیاز به آزمایش کومبس ( آنتی گلبولین ) دارند  .

کراس مچ اورژانس

بعنوان مثال کراس مچ ماژور :

1.      سرم بیمار بعلاوه سوسپانسیون RBC 5 – 7 % اهداء کننده خون به حجمهای مساوی در یک لوله آزمایش اضافه نمائید .

2.     سی الی شصت ثانیه سروفیوژ شود .

3.     در صورت عدم آگلوتیناسیون خون ارسال گردد .

4.     به لوله فوق الذکر ، یک قطره آلبومین گاوی 22% اضافه نمائید . 15 دقیقه در بن ماری 37 در جه سانتیگراد قرار دهید .

5.     سی الی شصت ثانیه سروفیوژ شود .

6.     در صورت وجود آگلوتیناسیون ، برای متوقف نمودن مصرف خون به بخش اطلاع دهید . کیسه خون ایزوگروپ دیگری که تااین محله ، متجانس بوده است به بخش ارسال گردد .

7.     در صورت عدم آگلوتیناسیون لوله را سه مرتبه شستشو داده وبه رسوب گلبول قرمز ، یک الی دو قطره آنتی هیومن اضافه نموده حدود 45 ثانیه سانتریفوژنمائید . ظرف 30 ثانیه نتیجه قرائت شود .در صورت عدم آگلوتیناسیون ، خون بطور کامل با سرم بیمار متجانس است . در صورت وجود آگلوتیناسیون ، خون نا متجانس بوده ومی باید سریعاً به بخش اعلام گردد که تزریق خون با ذکر مشخصات کامل کیسه ، قطع شود وخون دیگر یکه با سرم بیمار تجانس کامل دارد ارسال نمائید .

یاد آوری :  چناچه در هنگام کراس مچ بروش WHO در هر مرحله از اتو کنترل  و P . Cell ، در شرایط          Rt , S , Alb ,IDC  ,C  نتیجه مثبت بدست آید وخون متجانس در بانک خون بیمارستان موجود نباشد ،  5 سی سی  سرم بیمار را به انتقال خون استان ارسال نمائید تا در اسرع وقت ضمن تجسس وتعیین هویت آنت بادی بروش پانل سل ، در نهایت خون متجانس تهیه وجهت تزریق به بیمارستان ارسال شود .